此后经过约三百年的时间，在人类尝试应用输血来救治病人过程中，有的病人在痛苦中死亡，也有的病人被救治成功，因为这时的人类还不知道血型的存在。公元1900年，奥地利医生兰斯坦纳（Karl Landsteiner），根据他经常目睹输血病人有时平安无事，有的却痛苦死去。他执着于探究其中的道理。1900年他用22位同事的正常血液交叉混合，发现红细胞和血浆之间发生反应，也就是说某些血浆能促使另一些人的红细胞发生凝集现象，但也有的不发生凝集现象。于是，他将22人的血液实验结果编写在表格中，通过仔细观察这份表格，他终于发现了人类的血液按红血球与血清中的不同抗原和抗体分为许多类型，于是他把表格中的血型分成3种——A、B、O。

　　不同血型的血液混合在一起就会出现不同的情况，就可能发生凝血、溶血现象，这种现象如果发生在人体内，就会危及人的生命。两年以后，他和他的同事们将试验范围扩大到105人。他的两位同事阿尔弗雷德·范·德卡斯特罗（Alfred von Decastello）和阿德里亚诺·图里（Adriano Sturli）又发现一种较少的血型AB型。A、B、O和AB血型的发现为保障输血安全奠定了理论基础。1903年，威尔（Richard Weil）第一次异体输血取得了成功。Hektoen于1907年提出“交叉配血”以提高输血的安全性。美国医生奥坦伯格（Ottenberg）完成了首例运用血型和交叉配血的输血实验，他还观察到了血型的孟德尔遗传，并发现了O型血的通用性。